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培养基灭菌有物理法和化学法,其中较多使用、而且效果好、效果稳定的是物理法的热力灭菌法。常用的方法有高压蒸汽灭菌、常压蒸汽灭菌、间歇性灭菌法、过滤除菌、化学药剂灭菌法。
要求有高压蒸汽锅,技术指标*高温达140℃或2kg/?压力。物品在密闭容器内,水经过加热产生高压蒸汽而提高温度达到灭菌的目的。一般培养基可用121℃保持20min即可达到灭菌效果,已经把菌丝营养体、孢子、芽孢全部杀死。但如果基质内含有葡萄糖、马铃薯、豆芽汁、维生素等物质则应用115℃保持20min为宜,否则过高温度会破坏营养物,而产生有毒物质不利于食用菌生长。木屑、甘蔗渣、棉籽壳、麦粒、草料、粪干等物质原来含菌量较大而且含水量较少,宜用129℃保持12.5h灭菌。
物品在锅内以常压蒸汽经行灭菌。通常蒸汽温度为95105℃,因此,灭菌的时间要求68h才能达到效果。这种方法适合人力,燃料充足,未有能力购置高压蒸汽锅的地方使用。这种方法对保持培养基的养分较好。
对不宜超过100℃高温的物品较好。培养基置锅内经100℃高温蒸1h,杀死杂菌的营养体,保温在2530℃24h,残留的孢子萌发成营养体。进行第二次蒸煮1h把萌发的孢子杀死。同法,进行第三次蒸煮1h保温等做法,即可达到完全灭菌的效果。
一些不耐高温的物品经过机械阻留的技术把杂菌出去。如血清、维生素、氨基酸等物多用此法除菌。要求设置抽滤瓶和空气压缩机才能进行。
常用的化学药剂有***化***、高锰酸钾、漂******、福尔马林、酒精等。在食用菌栽培中,这些化学剂的灭菌效果不稳定,而且有些影响到产品的安全性,如***化***不宜用于食物,而多用于表面消毒或环境消毒。
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